UTILIZACIÓN DE UMBRALES DE EXTRACCIÓN DIFERENCIAL PARA DEDUCIR LA EXISTENCIA DE ESPERMATOZOIDES EN MUESTRAS DE CASOS FORENSES
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Date
2024-10-25
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RESUMEN
El presente trabajo de investigación se basa en el estudio específico de las muestras recolectadas para estudio forense, en casos de delitos sexuales, se obtienen del cuerpo de la víctima, lo que significa que pueden contener predominantemente células epiteliales de ella. Esto significa que, si se lleva a cabo un análisis directo sobre la muestra, sin haber realizado una preparación previa de la misma, se podrían obtener resultados no satisfactorios.
Una de las técnicas más empleadas para el aislamiento de espermatozoides en estos casos es la extracción diferencial (DE). Este método se basa en el aislamiento de información genética del agresor a partir de las características químicas de los espermatozoides y las células epiteliales. Esto es posible ya que las células epiteliales son significativamente más grandes y más frágiles que los espermatozoides y se lisan fácilmente con la adición de detergentes y agitación suave, no así en el caso de los espermatozoides, pues la cabeza que es la que contiene ADN está rodeada por el acrosoma y la membrana del esperma, que funcionan como capas protectoras de enlaces disulfuro, proporcionando así una resistencia considerable a la lisis celular. De modo que el objetivo de la extracción diferencial es lisar selectivamente y recolectar el ADN nuclear de las células epiteliales frágiles antes de la lisis y la extracción del ADN de los espermatozoides para evitar de esta forma interferencias en el análisis de ADN.
En esta oportunidad se evaluó un conjunto de tipos de muestras biológicas de donantes masculinos, incluidas células bucales, epiteliales, saliva y semen, para evaluar el fraccionamiento del ADN masculino utilizando protocolos de extracción y cuantificación diferencial.
ABSTRACT
This research work is based on the specific study of samples collected for forensic study in cases of sexual crimes, which are obtained from the victim's body, which means that they may contain predominantly epithelial cells from the victim. This means that, if a direct analysis is carried out on the sample, without having previously prepared it, unsatisfactory results could be obtained.
One of the most commonly used techniques for the isolation of sperm in these cases is differential extraction (DE). This method is based on the isolation of genetic information of the aggressor from the chemical characteristics of the sperm and epithelial cells. This is possible because epithelial cells are significantly larger and more fragile than sperm and are easily lysed with the addition of detergents and gentle agitation. This is not the case for sperm, since the head, which contains DNA, is surrounded by the acrosome and sperm membrane, which function as protective layers of disulfide bonds, thus providing considerable resistance to cell lysis. Thus, the objective of differential extraction is to selectively lyse and collect nuclear DNA from fragile epithelial cells prior to lysis and extraction of sperm DNA in order to avoid interference in DNA analysis.
On this occasion, a set of biological sample types from male donors, including buccal, epithelial, saliva and semen cells, were evaluated to assess the fractionation of male DNA using differential extraction and quantification protocols.
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Description
Keywords
Extracción diferencial, espermatozoides, células epiteliales, genética